貨號規(guī)格

 產(chǎn)品簡介

胰蛋白酶（Trypsin）是一種絲氨酸水解酶，它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切段，水解細胞間的蛋白質(zhì)，破壞細胞間的連接，從而使組織或貼壁細胞離散成單個細胞。胰酶分散細胞的活性與組織或細胞的特性、胰酶濃度、溫度和作用時間有關(guān)，在pH 8.0和 37℃ 時，胰酶的作用能力最強，因此使用胰酶時，應把握好濃度、溫度和時間，以免消化過度造成細胞損傷。

一般常用胰酶的工作濃度為0.25%，而半貼壁細胞或?qū)σ让该舾械募毎２捎玫蜐舛龋?/span>0.05%）的胰酶進行細胞消化。由于EDTA能夠螯合Ca²⁺和Mg²⁺，從而破壞細胞連接促進細胞的解離，因此在胰酶溶液中常常會加入一定量的EDTA混合使用，以增強解離效果。

本品為溶于 PBS 平衡鹽溶液的胰酶-EDTA溶液，包含2.5 g/L胰酶（1:250），0.2g/L EDTA，不含鈣鎂，經(jīng)0.22 μm 濾膜過濾處理，可直接用于細胞消化。

   產(chǎn)品信息

        使用說明

貼壁細胞的消化：

1、吸去培養(yǎng)液,用無菌的 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。

2、加入少量胰酶細胞消化液（含酚紅），略蓋過細胞即可,室溫放置 30 秒至 2 分鐘。不同的細胞消化時間有所不同。

3、顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化，或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來；此時吸除胰酶細胞消化液；加入含血清的完全細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。

4、  如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細胞消化液重新消化。

5、如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000-2000g 離心 1 分鐘,沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。

組織的消化：

不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 注意事項

1、由于不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣，因此操作人員應根據(jù)實際情況，確定最佳消化時間；消化細胞時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁和生長狀況；

2、使用本產(chǎn)品時應注意無菌操作，避免污染；

3、不宜長時間放置于室溫環(huán)境或 2~8℃ 長期保存；

4、2～8℃ 中解凍，搖勻后使用，切忌反復凍融，用量較少時建議分裝凍存，不可反復凍融。

5、該產(chǎn)品中的酚紅會受溶液pH值的改變而變色，在-20℃中溶液pH變酸會呈現(xiàn)橙黃色，溫度恢復后變回紅色，顏色的變化不影響正常使用；

6、本產(chǎn)品僅用于科研或進一步研究使用，不用于診斷和治療。