產品規(guī)格
產品簡介
即用型快速封閉液是最新一代的即用型、高效快速蛋白印記實驗封閉液。封閉時間僅需 15 分鐘, 效果優(yōu)于脫脂奶粉、BSA、酪蛋白等傳統(tǒng)封閉液,簡化了蛋白印跡方案。使用快速封閉液封閉可阻止抗體檢測期間的非特異性結合,但允許進行特異性檢測。與傳統(tǒng)封閉液相比,有更高的信號,更低的背景值,信噪比更高。該試劑不含有哺乳動物來源的蛋白成分,避免與抗體發(fā)生交叉反應。該緩沖液可與磷酸化的抗體以及 NC 膜和 PVDF 膜兼容。但不適用于生物素標記的抗體。
保存條件
2-8℃保存,有效期12個月。
使用說明
1. 完成轉膜后,將膜移入到平皿或者其他適合的容器中(可以不洗滌膜)。
2. 根據膜的大小,加入適量體積的無蛋白快速封閉液,確保充分浸沒覆蓋膜,對于 7.5× 8 cm 的膜推薦使用量 5-10mL。
3. 置于水平搖床上,室溫條件下振蕩孵育 15 分鐘。
4. 取出封閉完成的膜,用洗滌液沖洗膜 2-3 次,即可用于一抗孵育等后續(xù) Western blot 實驗。
注意事項
1. 由于沒有任何一種封閉液是適用于所有實驗體系的,因此對于一些特殊的實驗或抗體,可能需要根據具體情況考慮使用其它更合適的封閉液;
2. 信號弱或者無信號:有可能是上樣量不足;轉膜效率低;抗體效價低,特異性差等原因造成,需要根據實驗情況優(yōu)化實驗條件;
3. 背景高:有可能是抗體使用量過多;膜洗滌時間不足;抗體和封閉液發(fā)生交叉反應;試劑或儀器設備被污染等原因造成,需要根據實驗具體情況進行調整。
4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作;
5. 本產品僅供科研使用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內!
實驗數據
樣本:Hela細胞系; 上樣量:5μg ;印跡膜:PVDF膜 ;上樣體積:5μl ;目的蛋白:Actin ;曝光時間:1s
每組實驗從左到右依次為:3μl蛋白Marker,5μg蛋白量的HeLa細胞裂解液、5μg蛋白量的HeLa細胞裂解液、
實際實驗結果會因樣品、抗體、實驗條件等的不同而存在差異,圖中數據僅供參考