產(chǎn)品規(guī)格
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 售價(jià)（元） |
增強(qiáng)型ATP檢測(cè)試劑盒 Enhanced ATP Assay Kit | EAP001 | 200T | 1000 |
*詳情可聯(lián)系客服咨詢
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本試劑盒根據(jù)螢火蟲(chóng)熒光素酶（firefly luciferase，也稱熒光素酶）催化熒光素產(chǎn)生熒光時(shí)需要ATP提供能量研制而成。當(dāng)螢火蟲(chóng)熒光素酶和熒光素都過(guò)量時(shí)，在一定的濃度范圍內(nèi)熒光的產(chǎn)生和ATP的濃度成正比從而高靈敏地檢測(cè)溶液中的ATP濃度。本試劑盒ATP的最低檢測(cè)濃度為0.1 nM，線性范圍為0.1 nM-10 μM。
產(chǎn)品特點(diǎn)
樣品制備簡(jiǎn)單
靈敏度高，線性范圍寬，在0.1 nM至10 μM范圍內(nèi)有良好檢測(cè)效果；
讀數(shù)穩(wěn)定：在開(kāi)始反應(yīng)后 10 分鐘內(nèi)化學(xué)發(fā)光無(wú)明顯下降；
使用方便快捷：通常 10-20 個(gè)樣品可以在 30-60 分鐘內(nèi)測(cè)定完畢。
產(chǎn)品組成
組分編號(hào) | 組分名稱 | 規(guī)格 |
EAP001-A | ATP檢測(cè)試劑 | 20 mL |
EAP001-B | ATP檢測(cè)裂解液 | 100 mL |
EAP001-C | ATP標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.5 mM） | 0.1 mL |
保存條件
干冰運(yùn)輸；-20℃ 保存，12 個(gè)月有效。
使用說(shuō)明
1.樣品測(cè)定的準(zhǔn)備：(注意：樣品裂解需在4℃或冰上操作)
對(duì)于貼壁細(xì)胞：
吸除培養(yǎng)液，按照6孔板每孔加入200 μL裂解液的比例(即相當(dāng)于細(xì)胞培養(yǎng)液量 2 毫升的1/10)加入裂解液，裂解細(xì)胞。
裂解后4℃ 12000g離心 5 分鐘，取上清，用于后續(xù)的測(cè)定。（選做）
對(duì)于懸浮細(xì)胞：
用離心管離心沉淀細(xì)胞，棄上清，輕輕彈散細(xì)胞，按照6孔板每孔的細(xì)胞量加入200 μL裂解液的比例加入裂解液，裂解細(xì)胞。
裂解后4℃ 12000g離心5分鐘，取上清，用于后續(xù)的測(cè)定。（選做）
對(duì)于組織樣品：
按照每 20 mg 組織加入約 100-200 μL裂解液的比例加入裂解液，然后用玻璃勻漿器或其它勻漿設(shè)備進(jìn)行勻漿。充分勻漿可以確保組織被完全裂解。裂解后 4℃ 12000g 離心5分鐘，取上清，用于后續(xù)的測(cè)定。
注：裂解后樣品中的ATP可在-20℃保存至少一周。
2.標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定的準(zhǔn)備：
冰浴上融解待用試劑，把ATP標(biāo)準(zhǔn)溶液用ATP檢測(cè)裂解液稀釋成適當(dāng)?shù)臐舛忍荻取＞唧w的濃度需根據(jù)樣品中ATP的濃度而定。初次檢測(cè)可以檢測(cè) 0.01、0.03、0.1、0.3、1、3和10 μM這幾個(gè)濃度，在后續(xù)的實(shí)驗(yàn)中，可以根據(jù)樣品中 ATP 的濃度對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度范圍進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。
編號(hào) | 裂解液體積（μL） | ATP體積 | 最終濃度（μM） |
A | 98 | 從 ATP 標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.5 mM）中取 2 μL | 10 |
B | 70 | 從A管取30 μL | 3 |
C | 90 | 從A管取10 μL | 1 |
D | 90 | 從B管取10 μL | 0.3 |
E | 90 | 從C管取10 μL | 0.1 |
F | 90 | 從D管取10 μL | 0.03 |
G | 90 | 從E管取10 μL | 0.01 |
3.ATP檢測(cè)工作液的配制：
按照每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品需100 μL ATP檢測(cè)工作液的比例配制適當(dāng)量的ATP檢測(cè)工作液。把待用試劑在冰浴上融解。
4.ATP濃度的測(cè)定：
a.加100 μLATP檢測(cè)工作液到檢測(cè)孔或檢測(cè)管內(nèi)。室溫放置 3-5 分鐘，以使本底性的ATP全部被消耗掉，從而降低本底。可以一次性把 10-20 個(gè)檢測(cè)孔或檢測(cè)管分別加上100μLATP檢測(cè)工作液，從而節(jié)省時(shí)間。
b.在檢測(cè)孔或檢測(cè)管內(nèi)加上20 μL樣品或標(biāo)準(zhǔn)品，迅速用槍(微量移液器)混勻，至少間隔2秒后，用化學(xué)發(fā)光儀(luminometer)或液閃儀測(cè)定RLU值或CPM。(注：樣品的體積可以自行在10-100 μL范圍內(nèi)調(diào)節(jié)。如果樣品中的ATP濃度比較低則可以加入50-100 μL樣品，如果樣品中ATP濃度比較高則可以加入較小體積的樣品，同時(shí)標(biāo)準(zhǔn)品也需要使用相同的體積。如果樣品中ATP的濃度特別高，可以用ATP檢測(cè)裂解液稀釋樣品后再測(cè)定。
注意事項(xiàng)
1.本試劑盒的檢測(cè)試劑中含有熒光素酶，為取得良好的使用效果，可以進(jìn)行分裝保存，但需注意分裝的容器不能有ATP污染；
2.熒光素酶的活性對(duì)溫度比較敏感，所以反應(yīng)前細(xì)胞和ATP檢測(cè)試劑均需平衡至室溫后再進(jìn) 行測(cè)定。請(qǐng)勿室溫存放；
3.檢測(cè)時(shí)需使用適合于細(xì)胞培養(yǎng)的白色或黑色的 96 孔板或 384 孔板。如果使用普通透明 的 96 孔板或 384 孔板，相鄰孔之間會(huì)產(chǎn)生相互干擾；
4.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套。
5.本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：
*博鷺騰試劑盒檢測(cè)的發(fā)光信號(hào)在30 min內(nèi)保持穩(wěn)定
*在0.1 nM至10 μM范圍內(nèi)有良好檢測(cè)效果