蛋白免疫印跡(WB)技術(shù)實驗服務(wù)
n 貨號
DZWB001、DZWB002
n 服務(wù)簡介
WB(Western blot),即蛋白印跡或免疫印跡(immunoblotting),通過凝膠電泳按照分子量大小分離蛋白,然后再利用特異性抗體識別這些蛋白,是一項在分子生物學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)等領(lǐng)域中應(yīng)用非?;A(chǔ)廣泛的技術(shù)。博鷺騰生物提供傳統(tǒng)化學(xué)發(fā)光免疫印跡(酶標記)和熒光免疫印跡。
n 服務(wù)優(yōu)勢
? 具有專業(yè)的蛋白印跡檢測成像儀器和技術(shù)團隊。
? 為客戶提供多種免疫印跡檢測方式及科研服務(wù)流程。
n 檢測流程
樣品制備→蛋白質(zhì)檢、定性定量→凝膠制備→凝膠電泳→轉(zhuǎn)膜→封閉→一抗、二抗孵育→成像分析
n 客戶提供內(nèi)容
? 待檢測樣品:新鮮或正確保存的組織、細胞或裂解蛋白樣品(動植物組織:>200mg,動植物細胞:>1×106個);請采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣品穩(wěn)定劑;
? 一抗和內(nèi)參抗體:普通一抗和內(nèi)參抗體可由博鷺騰提供;特殊一抗/二抗可委托本司購買,費用自付;
? 提供相應(yīng)的材料背景:目的蛋白相關(guān)資料,必要的實驗設(shè)計等;
? 運輸要求:干冰或液氮包裝寄送,樣本應(yīng)避免各類污染和反復(fù)凍融。
n 檢測交付內(nèi)容
①考馬斯亮藍對電泳膠的染色結(jié)果
②轉(zhuǎn)膜后的麗春紅染色圖
③曝光后的蛋白表達條帶(化學(xué)發(fā)光法或熒光法)
④對蛋白表達圖的灰度值分析
⑤實驗過程報告
n 服務(wù)說明
| 化學(xué)發(fā)光檢測法 | 熒光檢測法 |
主要優(yōu)點 | 極高靈敏度 | 同時檢測多個靶標 |
技術(shù)概述 | 增強型化學(xué)發(fā)光 (ECL) HRP 和AP底物實現(xiàn)皮克到飛克極的檢測水平 | 使用一抗和熒光基團標記二抗組合,在同一印跡上同時檢測多種蛋白質(zhì) |
信號源 | 酶促反應(yīng)的間接信號 | 熒光基團的直接信號 |
信號持續(xù)時間 | 短暫(幾小時) | 長(數(shù)周至數(shù)月) |
靈敏度 | 優(yōu)異 | 良好 |
一致性 | 不同印跡之間可能存在差異,可以通過使用信號穩(wěn)定持久的底物來減少差異 | 不同印跡之間的重現(xiàn)性高 |
檢測 | X光膠片和成像儀 | 成像儀:能夠激發(fā)熒光基團并檢測隨后的發(fā)射光 |
其他注意事項 | ①可以對印跡剝離并重新檢測②可以進行長時間的曝光,因為不需要激發(fā)光源來捕捉信號 | ①需要注意避免熒光污染 ②隨著多重檢測靶點數(shù)量的增加(避免抗體交叉反應(yīng)),抗體的選擇越來越有難度 |
服務(wù)周期 | 5-7天,多個樣品試情況而定 | 5-7天,多個樣品試情況而定 |
費用 | 1500-2000/單樣,多個樣品試情況而定 | 2000-2500/單樣,多個樣品試情況而定 |
n 服務(wù)流程及說明
1、請聯(lián)系技術(shù)支持人員,填寫實驗服務(wù)委托書,與我司商定具體的檢測實驗設(shè)計方案、費用。
2、客戶支付服務(wù)款項,并提供待測樣品及相關(guān)信息等,我司按照合同要求安排檢測實驗服務(wù)。
3、檢測服務(wù)完成后,我司按照客戶要求免費郵寄樣品。
4、因科學(xué)實驗的不確定性,實驗結(jié)果不一定會出現(xiàn)陽性結(jié)果,我們保證實驗結(jié)果的真實準確性,但是對結(jié)果是否符合預(yù)期不做承諾。