產(chǎn)品規(guī)格

產(chǎn)品簡介

BLT 488-鬼筆環(huán)肽為Alexa Fluor 488熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽，可發(fā)出高亮度、光穩(wěn)定的綠色熒光，染色反應(yīng)特異性強，專門用于對生物樣本進行標(biāo)記和檢測。鬼筆環(huán)肽是一種具有多個氨基酸鏈的天然化合物，化學(xué)結(jié)構(gòu)特別，由一個五元環(huán)和兩個七元環(huán)組成。這種結(jié)構(gòu)使得它能夠與某些分子特異性結(jié)合，具有高親和力和良好的特異性。而AF488則是一種熒光染料，與鬼筆環(huán)肽結(jié)合后，能夠產(chǎn)生強烈的熒光信號。

BLT 488-鬼筆環(huán)肽最大激發(fā)/發(fā)射波長（Ex/Em）為493/517 nm，以橙色的凍干粉形式提供，溶于DMSO。

保存條件

冰袋（wet ice）運輸；-20℃避光干燥保存，24 個月有效。

使用說明

1、儲液制備：

        取適量甲醇或無菌水溶解棕色BLT488-鬼筆環(huán)肽管中凍干的粉末，制備成 200T/mL 的儲液（300T 規(guī)格染料加入 1.5 mL 的液體，50T 規(guī)格染料加入 0.25 mL 的液體即可）。

       BLT 488-鬼筆環(huán)肽的一個單位（T）的定義是染色一個加載細(xì)胞的載玻片所用染料的量。對于BLT 488-鬼筆環(huán)肽，使用時的推薦稀釋比例為 1: 40-1: 200，一個單位相當(dāng)于 200 μL 總?cè)旧w積中加入 1-5 μL 200T/mL 儲備溶液。

注：稀釋比例可以根據(jù)實際染色效果進行適當(dāng)調(diào)整。

2、固定細(xì)胞染色：

以下方案是針對生長在玻璃蓋玻片或 8 孔室玻片上的貼壁細(xì)胞的染色步驟。BLT 488-鬼筆環(huán)肽也可用于染色固定的冷凍或石蠟組織切片。

（1）用 PBS 清洗細(xì)胞 3 次。

（2）用含有 4%甲醛的 PBS 溶液固定細(xì)胞，室溫固定 20 min。

注：甲醇可以在固定過程中破壞肌動蛋白。因此最好避免含有任何甲醇的固定劑。優(yōu)選的固定劑是不含甲醇的甲醛。

（3）用 PBS 清洗細(xì)胞 3 次。

（4）用含 0.5% Triton X-100 的 PBS 溶液在室溫下透化細(xì)胞 10 min。

（5）用 PBS 清洗細(xì)胞 3 次。

（6）用 200 μL PBS 稀釋 1-5 μL BLT 488-鬼筆環(huán)肽儲液，加入一個蓋玻片或孔中，室溫孵育 20 min，進行染色。

注：染色體積可根據(jù)樣本情況進行調(diào)節(jié)。孵育過程中為避免染液揮發(fā)，可將蓋玻片放于密封容器內(nèi)。

（7）用 PBS 清洗細(xì)胞 2-3 次。

（8）熒光顯微鏡觀察。BLT 488-鬼筆環(huán)肽具有很好的光穩(wěn)定，樣品可以在 PBS 中成像，但為了效果最佳，也可以使用抗熒光淬滅劑觀察。

3、活細(xì)胞染色：

      BLT 488-鬼筆環(huán)肽不具有細(xì)胞透性，因此沒有被廣泛用于活細(xì)胞標(biāo)記。然而，有報道稱活細(xì)胞可能通過胞飲或未知機制進行標(biāo)記。一般來說，染色活細(xì)胞時需要更多的染料?；蛘?，BLT 488-鬼筆環(huán)肽也可被注入到細(xì)胞中用于監(jiān)測肌動蛋白分布和細(xì)胞運動。

注意事項

1. 鬼筆環(huán)肽具有毒性，需小心操作（對人的半數(shù)致死劑量 LD50 約 2mg/kg）。為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2. 本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)！

3. 使用前請將產(chǎn)品瞬時離心至管底，再進行后續(xù)實驗。

4. 本產(chǎn)品為凍干粉形式，微量不易觀察，使用前請瞬時離心，加適當(dāng)溶劑溶解后使用，溶解后的溶液近乎透明色。