產(chǎn)品規(guī)格

產(chǎn)品簡介

ER-Tracker Green 染料是與格列本脲偶聯(lián)的 BODIPY 染料的衍生物，對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高選擇性結(jié)合，在低濃度下對細(xì)胞無毒性，該類染料屬于環(huán)境敏感型的探針，與甲醛處理后仍能保留部分熒光，具有熒光壽命高，消光系數(shù)好等特點。格列本脲是一種常用2型糖尿病的治療藥物，可以高度結(jié)合主要定位在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的包含ATP敏感的鉀離子通道(K_ATP channel)的磺脲類受體。ER-Tracker Green 不適合對固定后細(xì)胞進行染色。

ER-Tracker Green的Ex/Em (nm)為504/511，使用配套的稀釋液稀釋該探針，后進行染色，可得到最佳實驗結(jié)果。

保存條件

冰袋（wet ice）運輸；4℃保存，密封儲存，遠(yuǎn)離潮濕和光線。

使用說明

體外研究(In Vitro)

1. ER-Tracker Green工作液的制備

1.1 儲備液的制備

將100 μg ER-Tracker Green溶解于128 μL DMSO中，得到1 mM的儲備液。

注：推薦貯備液于 -20℃或 -80℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

1.2 ER-Tracker Green工作液的配制

將貯備液用無血清稀釋細(xì)胞培養(yǎng)基或 PBS 以獲得 100 nM-1 μM 的 工作液。

注意：ER-Tracker Green工作液的濃度請根據(jù)實際情況調(diào)整。

2. 細(xì)胞染色

2.1 懸浮細(xì)胞 (6孔板)

A。4℃ 1000 g 離心 3-5 分鐘，棄上清。PBS洗滌2次，每次5分鐘。細(xì)胞密度為1×10⁶/mL。

b．加入1 mL工作液，室溫孵育5-30分鐘。

c． 4℃、400g離心3-4分鐘，棄上清。

d．用PBS洗滌2次，每次5分鐘。

e．用無血清細(xì)胞培養(yǎng)基或 PBS 重懸細(xì)胞。熒光顯微鏡或流式細(xì)胞術(shù)觀察。

2.2 貼壁細(xì)胞

a．在無菌蓋玻片上培養(yǎng)貼壁細(xì)胞。

b.從培養(yǎng)基上取下蓋玻片并吸出多余的培養(yǎng)基。

c.加入100 μL工作液，輕搖使之完全覆蓋細(xì)胞，室溫孵育5-30分鐘。

d．用培養(yǎng)基洗兩次，每次5分鐘。熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀觀察。

注：若采用流式細(xì)胞儀檢測，細(xì)胞需重懸后再染色。

細(xì)胞實驗：

溶液于-80°C保存，6個月內(nèi)有效；溶液于-20°C保存，1個月內(nèi)有效（密封儲存，遠(yuǎn)離潮濕和光線）

DMSO 中的溶解度 : 50 mg/mL (63.85 mM; 超聲助溶; 吸濕的 DMSO 對產(chǎn)品的溶解度有顯著影響，請使用新開封的 DMSO)

注意事項

1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2. 本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)！