產(chǎn)品規(guī)格

產(chǎn)品簡介 

高爾基體是由單位膜構(gòu)成的扁平囊疊加在一起所組成。扁平囊為圓形，邊緣膨大且具有穿孔。高爾基體熒光探針是一種 BODIPY 標(biāo)記的神經(jīng)酰胺衍生物。神經(jīng)酰胺的合成發(fā)生在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，高爾基體熒光探針可以通過神經(jīng)酰胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（CERT）或囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)輸送到高爾基體，從而實(shí)現(xiàn)染料的特異性標(biāo)記。Golgi-Tracker Green是一種高爾基體特異性綠色熒光染料，可實(shí)現(xiàn)單個(gè)細(xì)胞可視化。Ex/Em=505 nm/512 nm。結(jié)構(gòu)見下圖。

保存條件

冰袋（wet ice）運(yùn)輸；-20℃避光保存。

使用說明

1.Golgi 工作液配制

1.1 制備儲(chǔ)存液

用 DMSO 配制 5 mM 儲(chǔ)備液。

注意：建議將儲(chǔ)備液在 -20°C 或 -80°C 避光保存，避免反復(fù)凍融循環(huán)。

1.2 工作液的配制

用預(yù)熱好的 PBS 或培養(yǎng)基溶液，配制成 1-10 μM 的 Golgi 工作液。

注：請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整 Golgi 1-43 工作液濃度，且現(xiàn)用現(xiàn)配。

2. 細(xì)胞染色（懸浮細(xì)胞）

2.1 收集細(xì)胞：1000 g，4°C，離心 3-5 分鐘，棄去上清。加入 PBS 洗滌兩次，每次 5 分鐘。細(xì)胞密度在 1×10⁶/mL。

2.2 加入 1 mL Golgi 工作液，室溫孵育 20-30 分鐘。

2.3 400 g，4°C，離心 3-4 分鐘，棄去上清。

2.4 加入 PBS 洗滌細(xì)胞兩次，每次 5 分鐘。

2.5 用 1 mL 無血清培養(yǎng)基或 PBS 重懸細(xì)胞后，使用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行觀察。

3. 細(xì)胞染色（貼壁細(xì)胞）

3.1 將貼壁細(xì)胞培養(yǎng)于無菌蓋玻片上。

3.2 從培養(yǎng)基中移出蓋玻片，吸除多余培養(yǎng)基。

3.3 加入 100 μL 染料工作液，輕輕晃動(dòng)使其完全覆蓋細(xì)胞，孵育20-30 分鐘。

3.4 吸去染料工作液，用培養(yǎng)基洗 2 次，每次 5 分鐘，使用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行觀察。

DMSO 中的溶解度 : 50 mg/mL (83.11 mM; 超聲助溶 (<60°C); 吸濕的 DMSO 對(duì)產(chǎn)品的溶解度有顯著影響，請(qǐng)使用新開封的 DMSO)

注意事項(xiàng)

1. 建議儲(chǔ)存液在 -20℃ 或 -80℃ 避光保存，避免反復(fù)凍融。

2. 請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整 Golgi 1-43 工作液濃度與孵育時(shí)間。

3. 或使用效果不佳，去除細(xì)胞培養(yǎng)液時(shí)，可用適量 Hanks 平衡鹽溶液對(duì)細(xì)胞進(jìn)行洗滌。

4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

5. 本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)！