產(chǎn)品規(guī)格
產(chǎn)品參數(shù)
中文別名(Chinese synonym) | (4S)-4,5-二氫-2-(6-羥基-2-苯并噻唑)-4-噻唑羧酸鉀; (S)-4,5-二氫-2-(6-羥基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸鉀鹽 |
英文別名(English synonym) | D-Luciferin potassium salt |
CAS號(hào)(CAS NO.) | 115144-35-9 |
分子式(Formula) | C11H7N2O3S2 K,結(jié)構(gòu)式如下圖 |
分子量(Molecular weight) | 318.42 g/mol |
外觀(Appearance) | 淡黃色粉末 |
溶解性(Solubility) | 易溶于水(30 mg/mL) |
純度(Purity)(HPLC) | ≥98% |
最大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)(nm) | Ex=328nm/ Em533nm |
產(chǎn)品介紹
D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,可被催化生物發(fā)光產(chǎn)生典型的黃綠光,普遍應(yīng)用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域,特別是體內(nèi)活體成像技術(shù)。以ATP和Mg2+作為輔因子,有氧條件下熒光素酶與D-熒光素反應(yīng)發(fā)出一種特有的黃綠色發(fā)射光,在37℃活體內(nèi)轉(zhuǎn)換為紅光。熒光素酶的表達(dá)基因被轉(zhuǎn)染在研究動(dòng)物中比如大鼠、小鼠,用來(lái)標(biāo)記腫瘤細(xì)胞,干細(xì)胞或傳染病。通過(guò)生物熒光成像這個(gè)模式系統(tǒng)中注射D-熒光素可以用來(lái)實(shí)時(shí)非侵入性監(jiān)測(cè)疾病的進(jìn)程或藥物效率。當(dāng)熒光素過(guò)量時(shí),產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性,也可以基于ATP對(duì)此反應(yīng)體系的影響,用來(lái)指示能量或生命體征。
保存條件
冰袋(wet ice)運(yùn)輸;避光干燥保存。粉末:-20 ℃保存,2年有效;-80 ℃保存,4年有效。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1、生物發(fā)光性能
D-熒光素鉀鹽可使熒光素酶標(biāo)記基因和熒光素酶融合蛋白在活細(xì)胞、組織和生物體的表達(dá)發(fā)光成像。它的生物發(fā)光過(guò)程需要ATP和Mg2+作為輔因子,在有氧條件下與熒光素酶反應(yīng)產(chǎn)生黃綠色發(fā)射光,而在37℃的活體內(nèi)則會(huì)轉(zhuǎn)換為紅光。熒光素酶的表達(dá)基因可以被轉(zhuǎn)染到研究動(dòng)物中,如大鼠、小鼠,用來(lái)標(biāo)記腫瘤細(xì)胞、干細(xì)胞或傳染病。通過(guò)生物熒光成像技術(shù),可以實(shí)時(shí)、非侵入性地監(jiān)測(cè)疾病的進(jìn)程或藥物效果。
2、應(yīng)用范圍廣
D-熒光素鉀鹽在整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用,特別是在體內(nèi)活體成像技術(shù)中應(yīng)用較為廣泛。熒光素酶的表達(dá)基因可以被轉(zhuǎn)染到研究動(dòng)物的細(xì)胞中,用來(lái)標(biāo)記腫瘤細(xì)胞、干細(xì)胞或傳染病。通過(guò)生物熒光成像技術(shù),可以實(shí)時(shí)、非侵入性地監(jiān)測(cè)同時(shí),D-熒光素鉀鹽還可以被用于細(xì)胞活力檢測(cè)、衛(wèi)生監(jiān)控等方面。
3、安全性高
D-熒光素鉀鹽作為一種生物探針,具有較高的安全性。它是一種天然的化合物,不會(huì)對(duì)生物體產(chǎn)生有害影響。在體內(nèi)應(yīng)用時(shí),它能夠快速被代謝和清除,不會(huì)在體內(nèi)殘留太長(zhǎng)時(shí)間。因此,D-熒光素鉀鹽被廣泛應(yīng)用于生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷領(lǐng)域。
4、使用方便
D-熒光素鉀鹽能夠迅速溶于水或緩沖液中,使用方便。它不需要特殊的顯微鏡或設(shè)備,可以在常規(guī)的熒光檢測(cè)設(shè)備上進(jìn)行測(cè)量。同時(shí),它還具有高選擇性,能夠快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)ATP酶的活性,同時(shí)不會(huì)被其他酶類干擾。因此,D-熒光素鉀鹽在生物學(xué)研究中應(yīng)用非常廣泛。
使用方法
1. 體外生物發(fā)光檢測(cè)
1)用無(wú)菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,建議配制成15 mg/mL的儲(chǔ)存液。立即使用或分裝,-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融(注:配成溶液的D-熒光素鉀鹽儲(chǔ)存時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng));
2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲(chǔ)存液稀釋至適當(dāng)?shù)墓ぷ饕簼舛?,如?.15 mg/mL;
3)去除原培養(yǎng)基,替換加有D-熒光素鉀鹽的培養(yǎng)基,37℃孵育5-10 min;
4)然后進(jìn)行圖像分析。
2. 活體成像分析
1)用無(wú)菌的DPBS (不含Mg2+、Ca2+) 溶解D-熒光素鉀鹽,建議配制成15 mg/mL的熒光素的注射液,混勻;
2)用0.2 μm濾膜過(guò)濾除菌,立即使用或分裝,于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融(注:配成溶液的D-熒光素鉀鹽儲(chǔ)存時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng));
3)建議按照150 mg/kg的熒光素用量/體重進(jìn)行注射相應(yīng)的量,如果你要注射熒光素時(shí)動(dòng)物依舊是清醒的,腹腔(IP)或皮下(SQ)注射需等待三分鐘后根據(jù)您的方法選擇(氣體或注射麻醉)使其鎮(zhèn)靜,而靜脈注射(IV)則需立即對(duì)動(dòng)物進(jìn)行鎮(zhèn)靜;
4)為建立熒光素酶表達(dá)的動(dòng)力學(xué)曲線,對(duì)于腹腔或皮下注射方法:每隔5-10分鐘拍攝一次成像時(shí)間可達(dá)40-60 分鐘,對(duì)于靜脈注射方法:每1-5分鐘拍攝一次可達(dá)20-30分鐘;
5)對(duì)于您的動(dòng)物模型從動(dòng)力學(xué)曲線中選擇最佳的成像時(shí)間點(diǎn),大部分動(dòng)物模型對(duì)于腹腔注射或皮下注射熒光素注入動(dòng)物體內(nèi)后大約10-15分鐘達(dá)到信號(hào)峰值,對(duì)于靜脈注射熒光素沒(méi)注入后2-5分鐘達(dá)到峰值;
6)實(shí)驗(yàn)時(shí)選擇光信號(hào)達(dá)到最強(qiáng)穩(wěn)定平臺(tái)期進(jìn)行成像分析。
注:建議對(duì)每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,從而確定最高信號(hào)檢測(cè)時(shí)間和信號(hào)平臺(tái)期。
溫馨提示
1.為了您的自身安全,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)做好有效防護(hù);
2.本品要進(jìn)行避光操作和保存,配成溶液過(guò)濾除菌后可分裝于-20℃或-80℃凍存,配成溶液的D-熒光素鉀鹽儲(chǔ)存時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng);
3.本產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)!
應(yīng)用案例