產(chǎn)品規(guī)格
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 售價(元) |
BLT Trans-R(siRNA)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑 | TR001 | 50 μL | 250 |
TR002 | 0.75 mL | 1390 |
產(chǎn)品簡介
本產(chǎn)品Trans-R(siRNA)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑采用新型陽離子聚合物納米材料,專用于轉(zhuǎn)染siRNA,具有較強(qiáng)的壓縮RNA的能力,可迅速高效的轉(zhuǎn)染到真核細(xì)胞中,且不被核酸酶降解,可適用絕大數(shù)貼壁生長的細(xì)胞,如一般細(xì)胞株,腫瘤細(xì)胞株。與其他RNA轉(zhuǎn)染試劑相比,具有耐血清能力強(qiáng)、毒性低、穩(wěn)定性好、轉(zhuǎn)染簡單易行、重復(fù)性好等優(yōu)點。
保存條件
常溫或冰袋(wet ice)運(yùn)輸;2-8 °C保存,有效期一年(不可冷凍)。
轉(zhuǎn)染實例對比
使用說明
siRNA轉(zhuǎn)染(以24孔板為例):
(1)細(xì)胞培養(yǎng):在轉(zhuǎn)染前一天(12-24小時)按照每孔約0.5~1.0*105個細(xì)胞接種到孔板內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng),使第二天細(xì)胞密度能達(dá)到約60-80%。
注:具體的細(xì)胞數(shù)量根據(jù)孔板類型,細(xì)胞類型和細(xì)胞生長速度等而定,保證細(xì)胞融合度在60%以上。
(2)siRNA和轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物形成:按照下表對siRNA和轉(zhuǎn)染試劑用無血清培養(yǎng)基或者Opti-MEM 培養(yǎng)基分別進(jìn)行稀釋,然后將稀釋好的轉(zhuǎn)染試劑盡快全部加入到已稀釋好的siRNA稀釋液中,輕輕混勻,室溫靜置復(fù)合10-15 min。
| 96-Well | 48-Well | 24-Well | 12-Well | 6-Well |
培養(yǎng)液體積(mL) | 0.2 | 0.3 | 0.5 | 1 | 2 |
稀釋液體積(μL) | 5 | 8 | 10 | 20 | 50 |
RNA用量(pmol) | 7.5 | 10 | 15 | 30 | 60 |
轉(zhuǎn)染試劑用量(μL) | 0.5 | 0.8 | 1.0 | 2.0 | 4.0 |
以24孔板為例:①將 15 pmol 待轉(zhuǎn)染的siRNA稀釋至10 μL,混勻;②將1 μL Trans-R 轉(zhuǎn)染試劑稀釋至10μL,③稀釋好的轉(zhuǎn)染試劑盡快全部加入到已稀釋好的siRNA稀釋液中,輕輕混勻,室溫靜置復(fù)合10-15 min |
復(fù)合物加入總量(μL) | 2×5 | 2×8 | 2×10 | 2×20 | 2×50 |
注:該表使用量僅供參考,具體使用量還需根據(jù)細(xì)胞類型及其他實驗條件進(jìn)行優(yōu)化,初次可通過改變細(xì)胞密度,RNA濃度,轉(zhuǎn)染試劑濃度對轉(zhuǎn)染條件進(jìn)行優(yōu)化以得到最大的轉(zhuǎn)染效率。轉(zhuǎn)染試劑(μL): siRNA(pmol)可以在0.02:1和0.15:1之間調(diào)整。
(3)轉(zhuǎn)染培養(yǎng):將上述轉(zhuǎn)染復(fù)合物均勻加入到24孔板中,輕輕晃動培養(yǎng)皿或輕微振蕩,在37 °C,5% CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)18-48小時后檢測轉(zhuǎn)染效率,無需更換培養(yǎng)基。
注意事項
1.為了您的自身安全,實驗前請做好有效防護(hù);
2.本品為siRNA的專用轉(zhuǎn)染試劑,也可以用于miRNA的轉(zhuǎn)染,但對轉(zhuǎn)染條件需要摸索,如有需要訂購mRNA專用轉(zhuǎn)染試劑;
3.Trans-R細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑可用于有血清培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)染,并且轉(zhuǎn)染前后不需要換培養(yǎng)基。
確保細(xì)胞培養(yǎng)液沒有被細(xì)菌、真菌或支原體污染;
4.本產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)!