產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 售價(元) |
核酸凝膠染料(10000×) | FD-GBL001 | 500 μL | 480 |
n 產(chǎn)品簡介:
BLT-GRed核酸凝膠染料(10000×)是一種靈敏、穩(wěn)定、對環(huán)境安全的熒光核酸凝膠染料,功能同GelRed,可用于對瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠中的dsDNA,ssDNA以及RNA進行染色。其表現(xiàn)出了極高的靈敏度。與EB一樣,在預制膠和電泳過程中染料不降解;而電泳后染色過程也只需30分鐘且無需脫色或沖洗,即可直接用紫外凝膠透射儀觀察,獨特的油性和大分子量特點使其不能穿透細胞膜進入細胞內(nèi),艾姆斯氏試驗結(jié)果也表明,該染料的誘變性遠遠小于EB。
n 產(chǎn)品特點:
1,光譜特性:
Excitation:標準透射照明器(302 或 312 nm)
Emission:溴化乙錠,SYBR 或 GelStar
過濾器TBE 緩沖液中,BLT-GRed與 dsDNA 結(jié)合物的激發(fā)(左)和發(fā)射(右)光譜
2,產(chǎn)品優(yōu)勢:
(1)靈敏度高:適用于各種大小片段的電泳染色,對核酸遷移的影響小于SYBRGreen I;
(2)穩(wěn)定性強:適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠,室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩(wěn)定,耐光性強;
(3)適用性廣:可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法);適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳;可用于dsDNA*ssDNA或RNA染色;與觀察EB的普通紫外凝膠透射儀觀察即可(藍光切膠儀),在300 nm紫外光附近可得到最佳激發(fā),標準的EB濾光片或SYBR濾光片都適用;
(4)操作簡單:與EB一樣,在預制膠和電泳過程中染料不降解;而電泳后染色過程也只需30分鐘且無需脫色或沖洗,即可直接用紫外凝膠透射儀觀察;
(5)信噪比高:樣品熒光信號強,背景信號低;
n 操作步驟
一、膠染法(前染法)(用法同EB,推薦)
1.制膠時加入,使其在凝膠中的終濃度為1×,每50 mL 瓊脂糖溶液中加入5 μL的10000×儲液,以此比例類推(因為非常靈敏,電泳過程中DNA marker 上樣量只需1-2 μL,而不是EB電泳中的5 μL,請嚴控DNA marker 上樣量)
2.按常規(guī)方法電泳,觀測結(jié)果。
注:由于BLT-GRed具有良好的熱穩(wěn)定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。含有染料的預制凝膠溶液可以大量制備,并長期保存直到使用,此方法不適合預制聚丙烯酰胺凝膠,對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。
二、泡染法(后染法)
1.按照常規(guī)方法進行電泳。
2.用dH2O將10000×儲液稀釋約3300倍到0.1 M NaCl中,制成3×染色液。(例如將15 μL的10000×儲液和5 mL 1M NaCl加到45 mL dH2O中)。
3.將凝膠小心放入合適的容器中,緩慢加入足量的3×染色液浸沒膠。室溫振蕩染色約30 min即可,最佳染色時間根據(jù)凝膠厚度及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于3.5-10%丙烯酰胺膠,染色時間通常介于30 min - 1 h,并隨丙烯酰胺含量增加而延長。然后觀測結(jié)果。
n 注意事項
1.BLT-GRed不能被488 nm氬離子激光器或相似波長的可見光完全激發(fā),因此不推薦使用此類激發(fā)裝置的成像系統(tǒng)。
2.為了您的自身安全,實驗前請做好有效防護;
3.本產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)!