? 產(chǎn)品簡介
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液,RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western Blot、IP、ELISA等。
? 產(chǎn)品規(guī)格
? 保存條件
-20℃保存,有效期12個月。
? 使用方法
根據(jù)使用量加入PMSF,使PMSF的最終濃度為1 mM,混勻備用(PMSF現(xiàn)配現(xiàn)用)。
1.樣品前處理
1)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用PBS,生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液,用槍吹打數(shù)下,使其充分接觸;
2)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散,按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成50-100萬細(xì)胞/管,然后再裂解;
3)對于組織樣品:把組織剪切成細(xì)小的碎片,按照每20 mg組織加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量,用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
2.樣品后處理
將裂解后的樣品10000-14000 g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western Blot、ELISA和免疫沉淀(immunol precipitation,IP)等操作。
? 溫馨提示
1. 本產(chǎn)品請按使用情況適當(dāng)分裝保存,為取得最佳的使用效果,盡量避免反復(fù)凍融。
2. 裂解樣品的所有步驟都需在冰上或4℃進(jìn)行。
3. 本產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。