n產(chǎn)品參數(shù)
產(chǎn)品名稱 | 最低檢測(cè)靈敏度 | 編號(hào) | 規(guī)格 | 售價(jià) |
高敏型化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒 | 低皮克級(jí) | ECL001 | 2×50 mL | ￥198.00 |
（High Sensitive ECL Detection Kit） | ECL002 | 2×250 mL | ￥788.00 |
n產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本試劑盒是基于魯米諾底物的化學(xué)發(fā)光試劑盒，用于檢測(cè)直接或間接標(biāo)記辣根過(guò)氧化物酶（HRP）的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原。主要應(yīng)用于Western檢測(cè)以及化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)系統(tǒng)。檢測(cè)原理是，蛋白混合物經(jīng)電泳后轉(zhuǎn)移到印跡膜上，經(jīng)辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的抗體與膜上的蛋白直接或間接特異反應(yīng)，然后發(fā)光檢測(cè)工作液被辣根過(guò)氧化物酶（HRP）催化發(fā)光，發(fā)出特定波長(zhǎng)熒光（400-450 nm），從而可以通過(guò)X光膠片壓片曝光或化學(xué)發(fā)光成像設(shè)備直接掃描檢測(cè)信號(hào)。
本試劑盒使用了新型高效增強(qiáng)劑，發(fā)光強(qiáng)度比傳統(tǒng)ECL顯色液顯著提高，并有效降低了背景。本司提供三款不同檢測(cè)靈敏度的ECL試劑盒，可適配不同豐度的目的蛋白檢測(cè)，對(duì)于豐度比較高的目的蛋白的檢測(cè)，例如內(nèi)參蛋白等的檢測(cè)，推薦使用性價(jià)比更高的高敏型試劑盒；對(duì)于低豐度較難檢測(cè)的目的蛋白，優(yōu)先推薦使用特超敏試劑盒。
n保存條件
2-8℃保存，有效期12個(gè)月。Solution A需注意避光保存。
n使用方法
1. 按常規(guī)Western blot操作進(jìn)行，二抗孵育后，在進(jìn)行最后一次洗滌時(shí)根據(jù)膜的大?。?0 cm2 膜混合0.5 mL Solution A和0.5 mL Solution B），按照Solution A: Solution B=1:1比例配制發(fā)光檢測(cè)工作液。
注：工作液建議現(xiàn)配現(xiàn)用，配制后室溫放置數(shù)小時(shí)后靈敏度可能略有降低。
2. 用平頭鑷子將膜取出，膜的下緣輕輕接觸吸水紙，以去除膜上多余的液體。膜的蛋白面朝上，用吸管將配制的發(fā)光檢測(cè)液轉(zhuǎn)移到蛋白膜上，使其均勻覆蓋，室溫孵育2 min。
注：增加孵育時(shí)間不會(huì)增加靈敏度，有時(shí)還會(huì)導(dǎo)致條帶曝光時(shí)顯示異常。發(fā)光過(guò)程的本質(zhì)是酶促反應(yīng)，加入發(fā)光液過(guò)少同樣不利反應(yīng)進(jìn)行，會(huì)導(dǎo)致膜上條帶曝光不均和靈敏度明顯降低。
3. 用平頭鑷子夾持蛋白膜，膜的下緣輕輕接觸吸水紙，以去除膜上多余的發(fā)光液。將膜的蛋白面朝上并包裹于潔凈保鮮膜內(nèi)，輕輕趕出氣泡。
4. 壓片檢測(cè)：將膜固定在暗盒后，暗房?jī)?nèi)取出X光膠片放置暗盒中壓片1分鐘，立即顯影定影，根據(jù)其曝光結(jié)果，縮短或延長(zhǎng)下一張X光膠片的壓片時(shí)間。
5. 化學(xué)發(fā)光成像儀檢測(cè)：將膜直接放置于化學(xué)發(fā)光成像儀載物臺(tái)中，然后參考儀器的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行信號(hào)檢測(cè)。
n溫馨提示
1．Solution A和Solution B在吸取過(guò)程中必須要更換槍頭，兩種溶液相互污染后會(huì)導(dǎo)致逐漸失效，影響后續(xù)的使用效果；
2．各溶液使用后，請(qǐng)蓋緊瓶蓋，以防失效；
3．ECL的熒光持續(xù)時(shí)間很長(zhǎng)，但開(kāi)始反應(yīng)后的30分鐘內(nèi)熒光更強(qiáng)一些，隨后熒光會(huì)逐漸減弱，因此請(qǐng)注意充分利用這熒光較強(qiáng)的30分鐘進(jìn)行壓片；
4．為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作；
5．本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)！
博鷺騰選擇指南：
BLT | High Sensitive ECL 高敏型 | Super sensitive ECL 超敏型 | Ultre sensitive ECL 特超敏 |
適用情景 | 標(biāo)靶蛋白豐度較高，常規(guī)蛋白樣本 | 標(biāo)靶蛋白豐度適中，樣本有限 | 靶標(biāo)蛋白豐度極低，樣品極為珍貴 |
檢測(cè)靈敏度 | 低皮克級(jí) | 中飛克級(jí) | 低飛克級(jí) |
信號(hào)持續(xù)時(shí)間 | >1h | >1h | >1h |
適用檢測(cè)系統(tǒng) | 均適用X射線膠片，CCD成像儀、CMOS |
推薦用膜 | NC膜、PVDF膜 | NC膜、PVDF膜 | NC膜、PVDF膜 |
推薦一抗稀釋度 | 1:1,000-1:10,000 | 1:2,000-1:50,000 | 1:5,000-1:100,000 |
推薦二抗稀釋度 | 1:2,000-1:10,000 | 1:20,000-1:100,000 | 1:100,000-1:250,000 |
儲(chǔ)存穩(wěn)定性 | 2-8℃ 1年 | 2-8℃ 1年 | 2-8℃ 1年 |
優(yōu)勢(shì) | 同一級(jí)別靈敏度中發(fā)光信號(hào)更強(qiáng) | 兼顧性能與性價(jià)比，適用于多數(shù)WB實(shí)驗(yàn)， | 出色靈敏度，極其適用于低豐度蛋白檢測(cè) |
相關(guān)產(chǎn)品及價(jià)格：
實(shí)驗(yàn)效果：
蛋白樣品：人IgG蛋白連續(xù)稀釋
一抗：兔抗人IgG(1:3000)
二抗：辣根過(guò)氧化氫酶-山羊抗兔IgG(1:10000)
拍攝儀器：BLT 6000pro II
曝光時(shí)間：統(tǒng)一曝光時(shí)間1s
