n產(chǎn)品參數(shù)
產(chǎn)品名稱 | 最低檢測靈敏度 | 編號 | 規(guī)格 | 售價 |
特超敏化學發(fā)光檢測試劑盒 (Ultra sensitive ECL Detection Kit) | 低飛克級及以下 | EUL001 | 2×50 mL | ¥1,388.00 |
EUL002 | 2×100 mL | ¥2,488.00 |
EUL003 | 2×250 mL | ¥4,888.00 |
n產(chǎn)品簡介
本試劑盒是基于魯米諾底物的化學發(fā)光試劑盒,用于檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶(HRP)的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原。主要應(yīng)用于Western檢測以及化學發(fā)光免疫檢測系統(tǒng)。檢測原理是,蛋白混合物經(jīng)電泳后轉(zhuǎn)移到印跡膜上,經(jīng)辣根過氧化物酶(HRP)標記的抗體與膜上的蛋白直接或間接特異反應(yīng),然后發(fā)光檢測工作液被辣根過氧化物酶(HRP)催化發(fā)光,發(fā)出特定波長熒光(400-450 nm),從而可以通過X光膠片壓片曝光或化學發(fā)光成像設(shè)備直接掃描檢測信號。
本試劑盒使用了新型高效增強劑,發(fā)光強度比傳統(tǒng)ECL顯色液顯著提高,并有效降低了背景。本司提供三款不同檢測靈敏度的ECL試劑盒,可適配不同豐度的目的蛋白檢測,對于豐度比較高的目的蛋白的檢測,例如內(nèi)參蛋白等的檢測,推薦使用性價比更高的高敏型試劑盒;對于低豐度較難檢測的目的蛋白,優(yōu)先推薦使用特超敏試劑盒。
n保存條件
2-8℃保存,有效期12個月。Solution A 需注意避光保存。
n使用方法
1. 按常規(guī) Western blot 操作進行,二抗孵育后,在進行最后一次洗滌時根據(jù)膜的大小(每10 cm2 膜混合 0.5 mL Solution A 和0.5 mL Solution B),按照 Solution A: Solution B=1:1比例配制發(fā)光檢測工作液。
注:工作液建議現(xiàn)配現(xiàn)用,配制后室溫放置數(shù)小時后靈敏度可能略有降低。
2. 用平頭鑷子將膜取出,膜的下緣輕輕接觸吸水紙,以去除膜上多余的液體。膜的蛋白面朝上,用吸管將配制的發(fā)光檢測液轉(zhuǎn)移到蛋白膜上,使其均勻覆蓋,室溫孵育 2 min。
注:增加孵育時間不會增加靈敏度,有時還會導致條帶曝光時顯示異常。發(fā)光過程的本質(zhì)是酶促反應(yīng),加入發(fā)光液過少同樣不利反應(yīng)進行,會導致膜上條帶曝光不均和靈敏度明顯降低。
3. 用平頭鑷子夾持蛋白膜,膜的下緣輕輕接觸吸水紙,以去除膜上多余的發(fā)光液。將膜的蛋白面朝上并包裹于潔凈保鮮膜內(nèi),輕輕趕出氣泡。
4. 壓片檢測:將膜固定在暗盒后,暗房內(nèi)取出X光膠片放置暗盒中壓片1分鐘,立即顯影定影,根據(jù)其曝光結(jié)果,縮短或延長下一張X光膠片的壓片時間。
5. 化學發(fā)光成像儀檢測:將膜直接放置于化學發(fā)光成像儀載物臺中,然后參考儀器的說明書進行信號檢測。
n溫馨提示
1.Solution A 和 Solution B 在吸取過程中必須要更換槍頭,兩種溶液相互污染后會導致逐漸失效,影響后續(xù)的使用效果;
2.各溶液使用后,請蓋緊瓶蓋,以防失效;
3.ECL的熒光持續(xù)時間很長,但開始反應(yīng)后的 30 分鐘內(nèi)熒光更強一些,隨后熒光會逐漸減弱,因此請注意充分利用這熒光較強的 30 分鐘進行壓片;
4.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作;
5.本產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)!
博鷺騰選擇指南:
BLT | High Sensitive ECL 高敏型 | Super sensitive ECL 超敏型 | Ultre sensitive ECL 特超敏 |
適用情景 | 標靶蛋白豐度較高,常規(guī)蛋白樣本 | 標靶蛋白豐度適中,樣本有限 | 靶標蛋白豐度極低,樣品極為珍貴 |
檢測靈敏度 | 低皮克級 | 中飛克級 | 低飛克級 |
信號持續(xù)時間 | >1h | >1h | >1h |
適用檢測系統(tǒng) | 均適用X射線膠片,CCD成像儀、CMOS |
推薦用膜 | NC膜、PVDF膜 | NC膜、PVDF膜 | NC膜、PVDF膜 |
推薦一抗稀釋度 | 1:1,000-1:10,000 | 1:2,000-1:50,000 | 1:5,000-1:100,000 |
推薦二抗稀釋度 | 1:2,000-1:10,000 | 1:20,000-1:100,000 | 1:100,000-1:250,000 |
儲存穩(wěn)定性 | 2-8℃ 1年 | 2-8℃ 1年 | 2-8℃ 1年 |
優(yōu)勢 | 同一級別靈敏度中發(fā)光信號更強 | 兼顧性能與性價比,適用于多數(shù)WB實驗, | 出色靈敏度,極其適用于低豐度蛋白檢測 |
相關(guān)產(chǎn)品及價格:
實驗效果:
蛋白樣品:人IgG蛋白連續(xù)稀釋
一抗:兔抗人IgG(1:3000)
二抗:辣根過氧化氫酶-山羊抗兔IgG(1:10000)
拍攝儀器:BLT 6000pro II
曝光時間:統(tǒng)一曝光時間1s