| 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 售價(jià) |
| NLuc熒光素酶檢測(cè)試劑盒Nano Luciferase Reporter Gene Assay Kit | NLK001 | 100T | ￥880.00 |
| NLuc熒光素酶檢測(cè)試劑盒Nano Luciferase Reporter Gene Assay Kit | NLK002 | 500T | ￥2,880.00 |
n 產(chǎn)品簡介
NLuc熒光素酶是一種經(jīng)基因工程改造的小分子酶（19.1kDa），是性能卓越的生物發(fā)光報(bào)告基因蛋白。 它比螢火蟲（Photinus pyralis）或海腎熒光素酶亮約 150 倍，使用一種新型的腔腸素類似物（Furimazine） 可產(chǎn)生高強(qiáng)度、輝光型發(fā)光信號(hào)。該發(fā)光反應(yīng)不依賴 ATP，同時(shí)通過抑制本底發(fā)光信號(hào)而獲得最高的檢測(cè)靈敏度。
NLuc Reporter Gene Assay Kit提供了一種簡單的、可單次添加的試劑，具有靈敏度高的特點(diǎn)，它可在 NLuc螢光素酶存在的情況下產(chǎn)生較強(qiáng)信號(hào)。
n 產(chǎn)品規(guī)格
組分編號(hào) | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 |
NLK001 | NLK002 | NLK003 |
NLK001/NLK002/NLK003-A | NLuc檢測(cè)緩沖液 | 10 mL | 50 mL | 1 mL |
NLK001/NLK002/NLK003-B | NLuc檢測(cè)底物（50×） | 200 μL | 1 mL | 20 μL |
n 保存條件
-20℃保存，有效期一年。NLuc檢測(cè)底物（50×）建議分裝-80℃保存。
? 操作流程
1.自備材料
PBS；多道排槍；白色不透光/黑色細(xì)胞培養(yǎng)板；化學(xué)發(fā)光儀或酶標(biāo)儀。
2.檢測(cè)前準(zhǔn)備
1）預(yù)先將NLuc檢測(cè)底物（50×）和NLuc檢測(cè)底物緩沖液放置于室溫。
2）根據(jù)實(shí)際使用量，以1:50的比例將適量的NLuc檢測(cè)底物（50×）與NLuc檢測(cè)底物緩沖液混勻，室溫避光備用。例如：如果需要10 mL反應(yīng)液，則需要加入0.2 mL的檢測(cè)底物。
注：建議現(xiàn)配現(xiàn)用，剩余的含有新型底物的反應(yīng)液在當(dāng)次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后不建議留存。
3.操作方法
1）從細(xì)胞培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞培養(yǎng)板，放置5-15 min，恢復(fù)至室溫。
注：使用白色不透光或者黑色的細(xì)胞培養(yǎng)板，減少孔間的信號(hào)干擾。
2）加入檢測(cè)溶液
使用多道排槍向每個(gè)細(xì)胞孔中加入平衡至室溫的含有底物的反應(yīng)液，加樣體積與細(xì)胞培養(yǎng)液體積相同并混勻。例如，96孔板通常加入80-100μL
培養(yǎng)液，相應(yīng)加入80μL-100μL檢測(cè)溶液；384孔板通常加入20-30μL 培養(yǎng)液，相應(yīng)加入20-30μL檢測(cè)溶液。
3）發(fā)光檢測(cè)
混勻后于化學(xué)發(fā)光儀或酶標(biāo)儀中檢測(cè)NLuc熒光素酶報(bào)告基因活性。
注：為得到最佳檢測(cè)結(jié)果，請(qǐng)?jiān)诩尤霗z測(cè)試劑后1小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)。
4.分析數(shù)據(jù)
（1）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，在每個(gè)培養(yǎng)板中都應(yīng)設(shè)置對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組和空白對(duì)照組。為了保證實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性，理論上每個(gè)實(shí)驗(yàn)組（包括對(duì)照組）都應(yīng)當(dāng)減去空白對(duì)照組的螢火蟲螢光素酶的發(fā)光測(cè)量值。
①空白對(duì)照組：
背景F：未轉(zhuǎn)染細(xì)胞+反應(yīng)液。
注：空白對(duì)照組的樣品量必須與實(shí)驗(yàn)樣品量相同，包含與實(shí)驗(yàn)樣品相同的培養(yǎng)基/血清組合，并加上完全相同的檢測(cè)試劑。
②實(shí)驗(yàn)組：轉(zhuǎn)染細(xì)胞經(jīng)實(shí)驗(yàn)化合物處理（即實(shí)驗(yàn)組F）。
③對(duì)照組：轉(zhuǎn)染細(xì)胞不經(jīng)處理，用以標(biāo)準(zhǔn)化結(jié)果（即對(duì)照組F）。
（2）計(jì)算結(jié)果：
實(shí)驗(yàn)組=實(shí)驗(yàn)組F-背景F。
對(duì)照組=對(duì)照組F-背景F。
表達(dá)倍數(shù)=實(shí)驗(yàn)組/對(duì)照組。
? 注意事項(xiàng)
1. 酶促反應(yīng)對(duì)溫度較為敏感，加樣檢測(cè)前務(wù)必將所有試劑平衡至室溫（20-25 ℃）再使用；
2. 檢測(cè)時(shí)需使用白色或黑色的96孔板。如果使用普通透明的96孔板，相鄰孔之間會(huì)產(chǎn)生相互干擾；
3. 檢測(cè)儀器：能檢測(cè)化學(xué)發(fā)光的儀器都適用，但由于不同儀器的設(shè)置和靈敏度不同，測(cè)得的光信號(hào)值也會(huì)不同；
4. 單管熒光測(cè)定儀測(cè)定，每個(gè)樣品與測(cè)定試劑混合后到測(cè)定前的時(shí)間應(yīng)保持一致；
5. 為了您的自身安全，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)做好有效防護(hù)；
6. 本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：
*在不同培養(yǎng)基中檢測(cè)的信號(hào)均達(dá)到和知名品牌同等水平甚至更高
*本試劑盒信號(hào)衰減程度和知名品牌一致
