? 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
5×SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(含 DTT) (SDS-PAGE Sample Loading Buffer,5×(with DTT))是蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行SDS-PAGE的即用型上樣緩沖液。產(chǎn)品中的SDS可與蛋白質(zhì)結(jié)合成SDS-蛋白質(zhì)復(fù)合物,使其帶上大量的負(fù)電荷,消除蛋白質(zhì)本身的電荷差異;產(chǎn)品中的DTT能使半胱氨酸殘基間的二硫鍵斷裂,破壞蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu),消除蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)之間的差異。最終,蛋白質(zhì)的遷移速度只與其分子量大小有關(guān)。溴酚藍(lán)用作電泳時(shí)的指示劑,以確定電泳的進(jìn)行情況。
? 產(chǎn)品規(guī)格
? 保存條件
-20°C保存,有效期24個(gè)月,建議分裝凍存,避免反復(fù)凍融。
? 使用方法
1. 室溫或水浴溶解蛋白上樣緩沖液后,室溫放置。
2. 按每4 μL蛋白質(zhì)樣品中加入1 μL的5×SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液,將蛋白樣本和蛋白上樣緩沖液充分混合均勻。
3. 95~100°C水浴加熱10 min,使蛋白質(zhì)充分變性。
4. 冷卻至室溫后,12,000 rpm離心2 min,收取上清。
5. 取10~20 μL上清加入SDS-PAGE凝膠加樣孔內(nèi)進(jìn)行電泳即可。
6. 通常當(dāng)藍(lán)色染料到達(dá)膠的底端處附近即可停止電泳。
? 溫馨提示
1. 本產(chǎn)品 -20°C保存時(shí),可能會(huì)出現(xiàn)SDS沉淀,請(qǐng)于溫水中溶解后使用。請(qǐng)按使用情況適當(dāng)分裝保存,避免反復(fù)凍融。
2. 樣品煮沸后,若仍有比較粘稠或粘稠狀的半透明物體,可適當(dāng)延長(zhǎng)煮沸時(shí)間或加入1×SDS上樣緩沖液后再次煮沸,使結(jié)合在基因組DNA上的蛋白質(zhì)充分釋放,并使基因組DNA部分?jǐn)嗔?,減少樣本粘稠度的產(chǎn)生。
3. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
4. 本制品含有DTT,具有輕微刺激性氣味,有一定的毒性。為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。