△圖2
實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物體內(nèi)成像使用了博鷺騰AniView系列多模式動(dòng)
物活體成像系統(tǒng)進(jìn)行拍攝。
為了實(shí)現(xiàn)體內(nèi)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，CaALN納米顆粒用DiR熒光標(biāo)記。如圖3 A第一行所示，腹腔內(nèi)可檢測(cè)到熒光素酶信號(hào)，提示腹腔內(nèi)異種移植小鼠模型成功建立。腫瘤建立14天后，通過(guò)腹腔注射CaALN/DiR或游離DiR來(lái)評(píng)價(jià)CaALN納米顆粒在小鼠體內(nèi)的分布。
腫瘤和器官的圖像和定量熒光強(qiáng)度證實(shí)了腹腔注射CaALN納米顆?？梢栽谧⑸?h后靶向腫瘤組織（圖3 A，B）。在游離DiR組中，熒光不僅分布在腫瘤部位，而且還分布在肝臟和脾臟（圖3 C，D）。CaALN的腫瘤靶向優(yōu)勢(shì)可能歸因于腹膜-等離子體屏障的存在，它在腹膜腔內(nèi)保持了較高的區(qū)域的CaALN納米顆粒濃度，并最終被癌細(xì)胞吸收（圖3 E）。相比之下，小分子可以通過(guò)腹膜-血漿屏障進(jìn)入腹膜下毛細(xì)血管，并通過(guò)肝、脾進(jìn)行代謝（圖3 F）。
△ 圖3
CaALN的體內(nèi)生物分布。
腹腔注射后SKOV3荷瘤小鼠體內(nèi)時(shí)間依賴性生物發(fā)光和熒光圖像。
經(jīng)腹腔注射A）CaALN/DiR和C）游離DiR后SKOV3荷瘤小鼠生物發(fā)光和熒光信號(hào)隨時(shí)間變化的圖像
B、 D）在腹腔注射72小時(shí)后，從SKOV3荷瘤小鼠解剖的腫瘤（Tu）、肝臟（Li）、心臟（He）、脾臟（Sp）、肺（Lu）和腎臟（Ki）的體外生物發(fā)光和熒光圖像。
E） CaALN納米顆粒和小分子的體內(nèi)分布圖示。
F） 用CaALN/DiR和DiR處理的小鼠體外組織的熒光強(qiáng)度（平均值±SD，n=3，***P<0.001，**P<0.01）。
受其體外抗腫瘤活性和體內(nèi)腫瘤靶向能力的影響，作者進(jìn)一步評(píng)價(jià)了CaALN納米顆粒的體內(nèi)腫瘤抑制活性。腫瘤細(xì)胞移植5天后，攜帶SKOV3的小鼠分別用PBS和兩種不同劑量的CaALN（10和25mg/kg，n=8）處理。對(duì)其中5只小鼠進(jìn)行定期成像并通過(guò)收集體重、腹圍和生存數(shù)據(jù)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。（圖4 A）。
如圖4 B，C所示，兩種劑量的CaALN處理組的生物發(fā)光維持了15天，這意味著完全抑制了腫瘤的生長(zhǎng)。
△ 圖4
CaALN對(duì)SKOV3小鼠的體內(nèi)抗腫瘤作用。
A） 使用SKOV3腹腔異種移植模型的體內(nèi)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)的示意圖。
B） 生物發(fā)光圖像，C）生物發(fā)光強(qiáng)度，D）體重，E）腹圍，F）每個(gè)治療組中SKOV3荷瘤小鼠的生存曲線。
G） 第31天的代表性腫瘤切片的H&E染色圖像和隧道組織化學(xué)圖像。
04 總結(jié)
在人卵巢癌細(xì)胞SKOV3的腹腔內(nèi)播散性小鼠模型中已經(jīng)證明，CaALN納米顆粒腹腔注射給藥主要積累在腫瘤組織中。此外，CaALN納米顆粒治療不僅降低了腫瘤負(fù)荷，而且抑制了腹水的形成，在卵巢癌的治療中具有相當(dāng)大的臨床應(yīng)用價(jià)值。本研究已經(jīng)證明了一種獨(dú)特的策略，使用阿侖膦酸鈉形成的鐵納米螯合劑，可以提高治療效力和減少小分子的副作用，以有效地治療腹膜癌。
論文鏈接https://doi.org/10.1002/advs.202203031